新一代Nanoimager可轻松实现超分辨荧光成像

最近几年来，随着活细胞体系单份子荧光成像技术的发展，膜蛋白单份子研究，特别是受体动力学的研究，已成为目前单份子研究领域中活跃的研究方向之1。近几年发展起来的超分辨成像技术因其能够突破光学衍射极限，而比传统光学显微镜具有更高的分辨率和更高的定位精度。

英国Oxford Nanoimaging公司新推控制步骤可根据实验要求自由编辑;出的超分辨荧光显微镜Nanoimager，由牛津大学Achillefs Kapanidis教授团队经过8年时间研发而成，是台大视野单份子FRET显微镜，将以的分辨率在单份子示踪、活细胞成像、蛋白互作、3D成像等研究领域发挥重要作用。

Nanoimager主要技术特点

横向分辨率 20nm;纵向分辨率 50nm

稳 下面本公司技术人员为大家介绍拉力机的功能特点和它的丈量原理定 性： 1 m/K的漂移; 1 nm 振幅

支持同时双色成像温柔序4色成像

采取1级激光，使用安全

Nanoimager采取PALM/dSTORM技术和光激活定位显微技术 ，利用单份子定位算法并结合光学系统艾里斑的形状，以超高精度(纳米量级)取得荧光份子的中心位置，然后用CCD将其信号进行收集转化终得到分辨率为20nm的超分辨图象。

Nanoimager主要利用案例

1、单份子FRET

FRET是1种两个荧光份子间非辐踩点、钉梢、运输、射性的能量转移方式，反应二者的份子间距(1般在2 10 nm的间距产生)。Nanoimager是世界台用于大视野单份子荧光共振能量转移的商业化仪器，其适用于smFRET的关键功能包括：同时双色成像;单份子散射光强度和整体平均的实时分析;视野中数千个单份子的高通量成像，和用交替荧光激起 smFRET的功能来定量化学计量与FRET效力。图2是smFRET用于研究单个DNA霍利迪交叉的动力学。

2、单份子示踪

Nanoimager可以在两个通道同时示踪细胞或纯化物样品中的单份子 ，并计算分散系数。细胞中份子的分散系数可以被示踪，如酶或蛋白可以通过药物和抗生素的反应来示踪。低分散率可以表示标记份子与另外一份子或结构的相互作用或相结合。

Nanoimager可以直接反应纯化样品中荧光粒子的分散率和预估大小，具有敏感性 和特异性 。

3、更大视野的成像

Nanoimager的每一个成像通道均有50 m x 80 m的大视野，且照明均匀，可以实现单份子或细胞的高通量成像并快速搜集数据。图4显示了以10倍于其他技术的速度对突变的大肠杆菌细胞的不同表型进行成像。为了取得不同表型的可靠的结果，需要对大量细胞进行比较。使用具有大视野，能够自动对焦和自动获得数据的智能化的3种基本配置：主机、微电脑、还有打印机Nanoimager可以显著加快全部实验速度和通量。将大视野与超分辨成像结合是Nanoimager的优势。

编辑点评

超分辨荧光成像特指分辨率打破了光学显微镜分辨率极限(200nm)的显微镜，技术原理主要有受激起射消耗显微镜技术和光激活定位显微镜技术。超分辨荧光显微镜以其的优势，已成为生物医学研究的重要工具。